AD494(DE3)大肠杆菌AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构。AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxin reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨苄或者其他非卡那霉素抗性的
AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构。AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxin reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨苄或者AD494(DE3)大肠杆菌其他非卡那霉素抗性的质粒,进行基因蛋白表达。 DE3是溶源性的 λDE3 所以带有T7 RNA聚合酶的染色体拷贝。该菌株适用于pET系列载体,及其他T7启动子系列载体。能够利用IPTG直接进行蛋白的诱导表达。
RNA提取法:试剂中的主要成分为异硫氰酸胍和苯酚,其中异硫氰酸胍可裂解细胞,促使核蛋白体的解离,使RNA与蛋白质分离,并将RNA释放到溶液中。当加入氯时,它可抽提酸性的苯酚,而酸性苯酚可促使RNA进入水相,AD494(DE3)大肠杆菌离心后可形成水相层和有机层,这样RNA与仍留在有机相中的蛋白质和DNA分离开。水相层(无色)主要为RNA,有机层(黄色)主要为DNA和蛋白质。
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