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AD494(DE3)大肠杆菌AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构。AD494菌株含有thioredoxin reductase (TrxB)基因突变,有利于细菌胞内的二硫键形成,能够帮助蛋白形成正确的三维折叠,形成有功能活力的蛋白。AD494菌株中的thioredoxin reductase (TrxB)突变具有卡那霉素抗性,因此该宿主菌只能用于氨苄或者其他非卡那霉素抗性的 AD494菌株来源于K12菌,有助于蛋白的形成正确的三维结构
水产芽孢杆菌的表达体系是食用等别安全的表达系统,其可通过增进表达载体的稳定性和增进芽孢杆菌表达体系的分泌来表达效率,获得越加效率的芽孢杆菌系统。该体系的优点有: 一、增进质粒的稳定性: 自主复制质粒、整合质粒与噬菌体均可以用作表达载体,自主复制的质粒应用较多。—代主要来自革兰氏阴性菌等,通过重组构成带有双抗性标志的嵌合质粒
细胞间的交流行为在自然界中十分常见,比如细菌间的群体感应行为、真菌间的交流、微生物与宿主细胞间的交流、真核生物细胞间的物质或信号交流等。利用人造细胞来模拟细胞间的物质传递、信号传导等功能具有重要的意义。本研究利用声波辐射力制备了人造细胞阵列及人造细胞/真实细胞异质阵列,通过改变压电陶瓷的共振频率和声场的类型,可以得到不同种类(一维、二维正方形、二维长方形、二维三角形)的人造细胞阵列,并且能够控制节点上人造细胞的个数;通过控制声场的开关,还可实现一维阵列与二维阵列间的动态转换
内容:通过PCR从克隆载体pUC18-3Z/Cry2A*上扩增水稻偏爱型密码子优化的抗虫基因cry2A*经限制性内切酶NdeI和BamHI双酶切定向插入到原核表达载体pET-28a(+)成功构建了在表达蛋白的N端只带有6个组氨酸标签的融合蛋白表达载体pET-28a(+)/Cry2A*并转入大肠杆菌BL21(DE3)中。通过对其表达条件进行优化发现在IPTG浓度为0.05mmol/L、诱导时间为3h、诱导温度为20℃的表达条件下目的蛋白大部分以可溶形式进行表达。采用Ni-NTA亲和柱纯化得到高纯度目的蛋白薄层扫描分析蛋白纯度达到95%