碱基配对

PCR技术（Polymerasechainreaction，PCR）是聚合酶链式反应的英文简称。 它是分子生物学中应用最为广泛的实验方法之一。 它由DNA重组、RNA的合成和蛋白质的体外重组等3个部分组成， 其中最重要的是PCR-DNA重组和PCR-蛋白质合成两部分

模板DNA(待扩增DNA)、引物、4种脱氧核苷酸(dNTPs)、DNA聚合酶和适宜的缓冲液。类似于DNA的自然复制过程，其特异性依靠于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。 PCR由变性--退火--延伸三个基本反应步骤构成： ①模板DNA的高温变性：模板DNA经加热至93℃左右一定时间后，使模板DNA双链或经PCR扩增形成的双链DNA解离，使之成为单链，以便它与引物结合，为下轮反应作预备； ②模板DNA与引物的低温退火(复性)：模板DNA经加热变性成单链后，温度降至55℃左右，引物与模板DNA单链的互补序列配对结合； ③引物的适温延伸：DNA模板--引物结合物在TaqDNA聚合酶的作用下，以dNTP为反应原料，靶序列为模板，按碱基配对与半保存复制原理，合成一条新的与模板DNA 链互补的半保存复制链重复循环变性-退火-延伸三过程，就可获得更多的“半保存复制链”，而且这种新链又可成为下次循环的模板

②脱氧核糖和磷酸交替连接，排列在外侧，构成基本骨架；碱基排列在内侧。 ③两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对，例如： （1）相对稳定性：DNA分子中磷酸和脱氧核糖交替连接方式不变；两条链间碱基互补配对方式不变。 （2）多样性：不同的DNA分子中脱氧核苷酸数目不同，排列顺序多种多样

碱基对是形成核酸DNA、RNA单体以及编码遗传信息的化学结构。组成碱基对的碱基包括腺嘌呤（A）、胸腺嘧啶（T）、鸟嘌呤（G）、胞嘧啶（C）、尿嘧啶（U）。在DNA或某些双链RNA分子结构中，由于碱基之间的氢键具有固定的数目和DNA两条链之间的距离保持不变，使碱基配对遵循一定的规律，腺嘌呤一定与胸腺嘧啶或者在RNA中的尿嘧啶配对，鸟嘌呤与胞嘧啶配对

②脱氧核糖和磷酸交替连接，排列在外侧，构成基本骨架；碱基排列在内侧。 ③两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对，例如： （1）相对稳定性：DNA分子中磷酸和脱氧核糖交替连接方式不变；两条链间碱基互补配对方式不变。 （2）多样性：不同的DNA分子中脱氧核苷酸数目不同，排列顺序多种多样

锁核酸（Locked Nucleic Acid，LNA）是一种新型的双环状寡核苷酸衍生物，其中β-D-呋喃核糖的2'-O、4’-C位通过缩水作用形成刚性的缩合结构。由于LNA和核苷酸在结构上存在着高相似性，因此与DNA和RNA具有极强的结合亲和力。当与互补的DNA或者RNA链杂交时，LNA寡核苷酸表现出极强的热稳定性

②脱氧核糖和磷酸交替连接，排列在外侧，构成基本骨架；碱基排列在内侧。 ③两条链上的碱基通过氢键连接成碱基对，例如： （1）相对稳定性：DNA分子中磷酸和脱氧核糖交替连接方式不变；两条链间碱基互补配对方式不变。 （2）多样性：不同的DNA分子中脱氧核苷酸数目不同，排列顺序多种多样