cas12a

Cas12a（又称 Cpf1），属于 2 类 V 型 CRISPR 效应蛋白，是在单链向导RNA 引导下与靶DNA 特定位点结合并切割的核酸内切酶，目前已经广泛应用于微生物、植物和动物的基因编辑中，并在分子诊断方面具有非常大的应用前景。Cas12a 识别并切割靶标双链 DNA（反应底物）的同时，其高效切割任意序列链 DNA(ssDNA)的活性被激活。通过设计两端带荧光标记或其他小分子标记的探针，实现 CRISPR/Cas12a 对DNA 检测的信号放大，常用的检测方法包括实时荧光法和胶体金法

在发表在《分子细胞》杂志上的论文中，斯坦福大学生物工程助理教授 Stanley Qi 和合作者宣布了他们在 CRISPR 领域迈出的重要一步：开发出一种高效、多用途的微型 CRISPR 系统。此前常用的 CRISPR 系统（使用 Cas9 及 Cas12a 等名称表示 CRISPR 相关蛋白质的各种版本）共包含约 1000 到 1500 个氨基酸，但这一次的“CasMINI”则只有 529 个。通过实验，研究人员证实 CasMINI 完全可以像更强大的前辈们那样删除、激活和编辑遗传密码

Cas12a 核酸酶（旧称 Cpf1）是依赖于 RNA 介导的内切核酸酶，在靶标 DNA 存在 PAM 的情况下，可特异地切割靶标双链 DNA。与 Cas9 不同：（1）Cas12a 只需要单个 crRNA，且体积更小、更易被递送至细胞中；（2）Cas12a 切割后产生粘性末端，更利于基因组编辑；（3）Cas12a 的切割位点远离其识别位点，为连续多次编辑提供了可能性；（4）Cas12a 识别的 PAM 序列与 Cas9 不同，因此提供了不同编辑位点的选择；针对不同的 Cas12a 蛋白，其识别靶标所需的 PAM 位点不同，其中部分 Cas12a 蛋白识别 TTN 位点，部分 Cas12a 蛋白识别 TTTN 位点。本产品中（包括Cas12a 酶）都不含任何除 Cas12a 外的任何其它核酸酶活性