摘要：该研究制备了一种高灵敏度的黄曲霉毒素B1（aflatoxin B1AFB1）单克隆抗体并基于该抗体建立间接竞争酶联免疫吸附法（indirect competition enzyme-linked immunosorbent assayic-ELISA）用于中药材中AFB1污染的高通量、快速筛查以保障中药用药安全性。研究中以改进的肟化法修饰AFB1后用EDC-NHS法偶联载体蛋白获得AFB1完全抗原更加简便且减少环境污染。并利用加大免疫剂量、多种方式注射等对Balb/c雌鼠进行免疫最终制备得AFB1单克隆抗体。通过对其免疫特性进行鉴定结果显示该AFB1单克隆抗体属于IgG2b型免疫球蛋白其灵敏度(IC50)可达0.15μg·L-1亲和力为2.81×108 L·mol-1与AFB2AFG1和AFG2交叉反应率分别为35.07%8.75%1.15%且与其他类真菌毒素几乎不存在交叉反应。基于该高灵敏度、高特异性抗体建立了ic-ELISA法并用于中药材酸枣仁样品的检测。采用基质匹配的标准曲线进行计算AFB1在0.05～0.58μg·L-1线性良好（R2=0.992）加样回收率为88.00%～119.0%检测限为1.69μg·kg-1。采用所建立的方法测定了33批酸枣仁样品中AFB1的污染情况其污染水平为3.62～206.58μg·kg-1其检测结果与UHPLC-MS/MS测定结果的线性相关系数为0.996并且无假阳性和假阴性情况表明所建立的ic-ELISA准确、可靠可为中药材酸枣仁中AFB1污染的快筛提供一种简便、有效的技术手段同时可为其他中药中AFB1的检测与监控提供参考。更多还原