水解酶（英语：Hydrolase）是一种催化化学键的水解的酶。举例来说，一种酶催化以下的化学反应就是水解酶：
水解酶是以“(底物)水解酶”这种格式来命名。但是，一般的名称却是“(底物)酶”，例如核酸酶就是一种水解酶分解核酸。
水解酶在EC编号中分类为EC 3，并以它分解的键再细分为几个子类：
伦敦大学玛莉皇后学院有关EC3的酶的介绍 （页面存档备份，存于互联网档案馆）
脂酶（胆盐依赖性脂酶、胃脂肪酶/舌脂肪酶、胰脂肪酶、溶酶体酸性脂肪酶、激素敏感性脂肪酶、内皮脂肪酶、肝脂肪酶、脂蛋白脂肪酶、单酰基甘油脂肪酶、二酰基甘油脂肪酶）