甲状腺激素（三碘甲状腺原氨酸（T3）、甲状腺素（T4））绝大部分是与血浆蛋白（甲状腺素结合球蛋白（TBG）、甲状腺素结合前清蛋白（TBPA）、血清白蛋白（Alb））相结合，仅约0.3%的体内发挥甲状腺激素特有的生理功能。故测定血中游离三碘甲腺原氨酸（FT3）、FT4的浓度更能反映甲状腺的功能和状态。

本试剂盒采用竞争法酶联免疫吸附检测技术。生物素标记合成的T3类似物，它的主要特点是在免疫反应中，不与TBG结合，又具有与甲状腺抗原相同的抗原性，在竟争抑制反应中，一定量的抗体与生物素标记的T3类似物及非标记抗原（校准品或标本）进行竟争反应，抗体与生物素标记合成的T3类似物结合量受非标记抗原量所抑制，非标记抗原量多，抗体与生物素标记合成的T3类似物结合就少，反之结合就多；反应平衡后，形成固相抗体-生物素化T3类似物，再加入酶标记的亲合素，形成固相抗体-生物素化T3类似物-酶标-亲合素的复合物，加入显色底物 TMB，避光显色。颜色反应的深浅与样本中FT3的浓度成反比。加入终止液终止反应，在 450 nm 波长测定吸光度值。

注：样品准备的相关试剂也不含在试剂盒中。