5’appdna/rna 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌me

5’AppDNA/RNA 热稳定连接酶来自嗜热碱甲烷杆菌（Methanobacterium thermoautotrophicum），是 RNA 连接酶催化亚基的赖氨酸点突变体。该酶催化的连接不依赖于ATP，但需要 5’预腺苷化的接头才能将其连接到 RNA 或单链 DNA 的 3’OH 末端。该酶也可催化 3’端被 2’-O-甲基化的RNA 和 5’预腺苷化接头的连接反应。连接反应的最适反应温度为 60-65℃。即使在 ATP 存在的情况下，该连接酶也不能使 RNA 或单链 DNA 的 5’端磷酸发生腺苷化，因此降低非特异性的串联和环化。该酶为热稳定型， 反应温度为65℃，此温度下降低了 RNA 的二级结构，大大提高连接效率。

二代测序文库构建中连接单链 DNA 和腺苷化的 DNA 接头。构建小 RNA 二代测序文库，可在较高温度下连接预腺苷化的接头和 RNA。