isothermal
HaiGene Bst系列恒温扩增用酶均来源于Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I,通过基因工程手段去除了其5'-3'外切酶活性,而保留了5'-3'聚合酶活性。经电子重构建与酶进化技术,使其具有更强的链置换能力、杂质耐受性和RT活性,因此是Isothermal amplification (LAMP)的绝佳用酶。与野生型 Bst DNA 聚合酶(大片段)相比,该系列Bst 聚合酶在扩增速度、特异性、产量、耐盐性和热稳定性等方面均有大幅提高
2003年底由美国能源部拨款支持阿波格技术公司等单位成功研发了等温熔炼炉(Isothermal Melting Furnace等温MT是指在恒定温度下进行熔炼在等温熔炼炉的熔池内铝熔体温度仅在很小的范围内变动而且处的温度几乎完全一致。铝熔体池中(熔铝炉)熔体温度即为放流温度降与铸造温度地和容化后的铝熔体在一个完全封闭的系统内循不流动由4个区不泵送区固体料区没加热区中间处理区即除气、净化处理区隔墙与熔池(保温炉膛)组成。 隔墙也是等温熔炼炉的重要组成部分隔墙(panel)也可以称为隔板其中装有电阻发热元件
张苑怡 吉林大学 遗传学教研室,长春 130021;中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京 100101 武娜 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京 100101 朱宝利 中国科学院微生物研究所 中国科学院病原微生物与免疫学重点实验室,北京 100101 基于DNA环介导恒温扩增技术 (Loop-mediated isothermal amplification,LAMP),探索建立一种应用于NDM-1基因 (New Metallo-β-Lactamase-1 Gene,NDM-1) 的快速检测方法,以适应临床实验室等的检测需求。利用LAMP技术,以NDM-1基因为靶序列,设计4组LAMP引物,并筛选最优引物组,建立LAMP反应体系与条件,进行灵敏度和特异性实验。结果表明整个检测过程仅需1 h,即可通过肉眼直接目测实验结果
首页工艺平台基因检测LAMP LAMP(loop-mediated isothermal amplification),即环介导等温扩增法,是一种新型的核酸扩增方法,其特点是针对靶基因的6个区域设计4种特异引物,在链置换DNA聚合酶(Bst DNA polymerase)的作用下,60-65℃恒温扩增,15-60分钟左右即可实现10^9~10^10倍的核酸扩增,具有操作简单、特异性强、产物易检测等特点。 在DNA合成时,从脱氧核糖核酸三磷酸底物(dNTPs)中析出的焦磷酸离子与反应溶液中的镁离子反应,产生大量焦磷酸镁沉淀,呈现白色。因此,可以把浑浊度作为反应的指标,只用肉眼观察白色浑浊沉淀,就能鉴定扩增与否,而不需要繁琐的电泳和紫外观察
