酶切位点
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则： ②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段
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该工具查找序列中的回文序列，在下面的文本框中输入核酸序列及回文序列的长度范围。 1. 序列 (非Fasta格式，A、T、G、C、U和简并碱基以外的字符将被过滤掉): 回文序列指的是双链DNA或RNA分子中的特定的核苷酸片段，该片段在其中一条链上按5'到3'读取的序列与其互补链上按相同的5'到3'读取的序列一致。回文序列的单链DNA或RNA，存在对称中心，对称中心两侧碱基关于该对称中心对称，可形成互补
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基因克隆（gene cloning）是将提取或合成的目的基因，与具有自主复制能力的载体（vector）基因拼接重组，并导入受体细胞进行无性繁殖从而形成新的基因分子的过程。 自上世纪七十年代创建第一个重组DNA分子克隆以来，基因克隆成为分子生物学的核心技术，促进了生物分子学进步，也有力推动了生物医学研究和产业的快速发展。 基因克隆技术首先有助于精准分析目的基因的表达与调控、蛋白相互作用，包括调控元件、转录因子研究以及非编码RNA研究等；其次，可以用于难以获取的天然蛋白的大规模生产；然后，可用于定型改造生物基因组结构，使之具有更大应用前景
展示的比对率是指唯一比对上的 reads 数占总 reads 数的 比例，是测序获得的有效数据。MspI 酶切效率即唯一比对 的 reads 中含酶切位点 reads 所占比例。通过软件比对， 进行甲基化位点分析，获得样本中可靠的甲基化位点信息
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Gibson 无缝连接试剂盒是一种混合酶系统，其可将任意方法线性化的载体和与其两端具有重叠区域的一个或多个 PCR 片段定向重组连接。该方法不依赖于 T4 DNA 连接酶，不受载体和目的片段的酶切位点限制，可在 30 分钟内实现 PCR 片段高效定向无缝克隆至载体的任意位置，从而获得完整的双链 DNA 分子。该试剂盒使用简单，只需加入合适比例的载体和 PCR 片段在室温孵育 15-30min 即可完成片段的连接
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