超螺旋
细胞转染效率受多种因素影响
细胞转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个: 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒的转染试剂,如Entranster试剂
从细胞裂解物中除去核酸降低粘度以利于纯化和制备蛋白
从细胞裂解物中除去核酸(降低粘度)以利于纯化和制备蛋白。 从全细胞裂解液中改进蛋白质的分离电泳和色谱分离。 OmniCleave™核酸内切酶是来自大肠杆菌高度纯化的重组酶,可降解单链和双链DNA和RNA,以及二,三,四核苷酸如(图1)
细胞转染效率受多种因素影响
细胞转染效率受多种因素影响,主要因素有下面几个: 不同细胞系转染效率通常不同,但细胞系的选择通常是根据实验的需要,因此在转染实验前应根据实验要求和细胞特性选择适合的转染试剂。每种转染试剂都会提供一些已经成功转染的细胞株列表和文献,通过这些资料可选择最适合实验设计的转染试剂。当然,最适合的是高效、低毒的转染试剂,如Entranster试剂
微环dna是传统质粒在大肠杆菌中通过位点特异性重组得到的一种
微环DNA是传统质粒在大肠杆菌中通过位点特异性重组得到的一种新颖的小环超螺旋表达框,其缺乏抗性标记基因、复制原点等细菌序列,从而增强了在临床上的安全性。由于微环中去除了质粒中包含的固有的载体骨架,从而避免了因骨架与表达基因的共价连接,导致的表达沉默 (即普通质粒在转染、DNA疫苗制备、病毒或抗体生产、临床前动物实验中经常由于不能持久且稳定的表达而限制应用)。大量体内、外实验表明,微环DNA具有表达时间长、表达效率高等特点