重要事项:请参阅数据表首页上的应用部分,以确定该产品是否已经验证,并且获批用于培养的细胞系 (IF-IC) 或冷冻组织切片 (IF-F)。

注:用超纯水或相当的纯净水制备溶液。

荧光物质偶联的二抗(建议使用的二抗)

注:首次使用一抗或荧光素标记二抗时,将抗体滴定至**稀释比例,使样品在最少的背景干扰下,获得最强的特异性信号。

注:细胞应当在多孔板、腔室玻片或盖玻片上直接培养、处理、固定和染色。

注:甲醛有毒性,仅限在通风橱中使用。

室温下固定细胞 15 分钟。

对新鲜未固定的冰冻组织,请立刻按下列步骤固定:

在切片上覆盖用 PBS 稀释的 2-4% 甲醛。

注:所有随后的孵育都应当在室温下完成,除非另外注明需要在潮湿光密盒或带盖的培养皿/板中孵育,以防止干燥和荧光物质淬灭。

在封闭缓冲液中封闭标本 60 分钟。

封闭标本时,按照说明书中推荐的稀释比例,在抗体稀释缓冲液中配制一抗。

吸去封闭缓冲液,加入稀释后的一抗。

注:如果使用与 Alexa Fluor® 荧光物质直接偶联的一抗,则跳到步骤 C8。

在用抗体稀释缓冲液稀释的荧光素偶联的二抗中,室温孵育样品 1-2 小时,避光。

为达到**效果,应立即采用适当的激发波长检测标本。将切片平放避光 4°C 环境下,可长期保存。