糖蛋白是蛋白质糖基化修饰作用后产生的一种蛋白质类型,生物体内约50%的蛋白质以糖蛋白的形式发挥其生物学功能。通过糖蛋白检测可对蛋白质糖基化修饰过程进行研究,糖蛋白检测包括糖基化修饰的定性定量分析、糖基化修饰位点分析等。
一般可使用液相色谱质谱联用(LC-MS)或亲水作用色谱串联质谱(HILIC-MS/MS)技术对特定修饰的糖蛋白进行检测,包括特定修饰糖蛋白的鉴定、糖基化结合位点鉴定等内容。
糖蛋白检测思路:在进行糖蛋白检测之前,需要对经过特定修饰的糖蛋白样本进行富集;之后进行内切酶裂解(如胰蛋白酶消化)得到小片段糖肽,得到的糖肽利用LC-MS或HILIC-MS/MS检测,根据质谱检测结果分析糖肽序列,即可鉴定得出带有特定糖链的所有糖蛋白,结合生物信息学可分析特定修饰糖蛋白糖基化修饰位点。