温和的洗脱条件可保留蛋白的抗原性和功能

温和的洗脱条件可保留蛋白的抗原性和功能。

利用该填料可实现高分辨率纯化，从而提高样品浓度。使用螯和谷胱甘肽的层析柱（例如 Glutathione Sepharose High Performance），利用亲和层析法从经过预处理的细菌裂解物中纯化带 GST 标签的蛋白。将带 GST 标签的蛋白结合到亲和层析填料上，并通过用结合缓冲液进行洗涤来去除杂质

使用还原型谷胱甘肽在温和的非变性条件下可以洗脱带 GST 标签的蛋白。纯化过程中保留了蛋白的抗原性和功能。可根据需要，使用位点特异性蛋白酶来酶切蛋白，将蛋白和 GST 标签分开，该位点特异性蛋白酶的识别序列位于 pGEX 质粒上多个克隆位点的紧邻上游。可以使用比色法或免疫法检测带 GST 标签的蛋白。