2.2 正、反义pcDNA-CATL的双酶切鉴定与测序:
华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科华中科技大学同济医学院附属同济医院骨科 武汉430030
摘要：目的: 构建人组织蛋白酶L (cathepsinL CATL) 基因的正、反义真核表达载体 观察其转染后对人骨肉瘤细胞MG-63侵袭特性的影响。方法: 用基因重组技术构建人组织蛋白酶L正、反义真核表达载体 转染人骨肉瘤细胞MG-63 RT-PCR和Westernblot检测CATL的mRNA和蛋白质的表达水平 并对转染前后骨肉瘤细胞的侵袭能力进行检测。结果: 正、反义真核表达载体成功构建并转染入MG-63细胞中。反义载体转染后的细胞CATL的mRNA和蛋白质的表达水平下降 体外侵袭实验表明细胞的侵袭力下降。结论: 反义CATL基因的转染使骨肉瘤细胞CATL的分泌水平下降 细胞的体外侵袭力下降。更多还原