2021年7月12日，浙江大学生命科学学院杜娟课题组在Frontiers in Plant Science上发表了题为“An Improved CRISPR/Cas9 System for Genome Editing in Populus by Using Mannopine Synthase (MAS) Promoter”的研究论文。该团队报道了在杨树84K（Populus alba × P. gearulosa）中使用一个新的CRISPR/Cas9编辑系统来编辑八氢番茄红素脱氢酶（PDS）基因，敲除效率可达67.5%，高于木本植物目前的报道，而使用甘露碱合成酶基因(MAS)-CRISPR/Cas9载体系统可进一步提高敲除效率至75%。

目前，利用CRISPR/Cas9技术成功编辑的木本植物的物种有：苹果、柑橘、葡萄、木薯、可可、咖啡、猕猴桃、石榴和杨树等。目前三种杨树Populus tomentosa Carr、717（Populus tremula×P.alba）和Shanxin yang（Populus davidiana×P.bolleana）中已有基因编辑的成功报道。在中国和韩国广泛栽种的杨树杂交种84K（Populus alba×P.glandulosa）是木本植物的模式植物，其充足的基因组序列信息及成熟的遗传转化技术，已经足够支撑我们利用CRISPR/Cas9的方法大规模研究基因功能。

图1 PagPDS基因的三个靶位点所在的位置T1、T2和T3。

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杨树84K CRISPR/Cas9重组载体图谱（a）pC1300-2x35S-Cas9-PagPDS-g1-g2

图3 转入PagPDS-2×35S/MAS-Cas9的转基因植株表型。

表1 转入PagPDS-2×35S/MAS-Cas9的T0代转基因植株的编辑效率。

CK，空载；ND，未确定。

CRISPR/Cas9转基因杨树84K的编辑类型（A）转入PagPDS-2×35S-Cas9的转基因植株（B）转入Pag

表2 转入PagPDS-2×35S/MAS-Cas9的转基因植株的编辑类型。

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