液相色谱仪已经成为生命科学、材料科学、环境科学等方面不可少的重要检测方法。现代科学技术的发展使得分析对象越来越复杂,分析要求越来越高,液相色谱的强大功能使其成为新世纪中解决生命科学、材料科学、环境科学等复杂体系发现难题的最有力的技术和方法。
目前基层实验室多采用反相色谱柱要减少色谱柱的污染最有效的办法是要纯化样品。凡是样品纯化得越干净色谱柱的寿命就越长;反之只有提取没有纯化的样品色谱柱柱效就会大幅下降。一般来说要提取纯化好的样品方法是用流动相溶解样品这样一方面能减少色谱图中的溶剂峰干扰另一方面也能检查样品在流动相中的溶解性。如果样品进样后在流动相中沉淀会堵塞进样器和柱头甚至样品分解出现鬼峰。如果出现样品与流动相不溶要设法改变溶解条件可更换样品溶剂或改进样品纯化处理的方法或滤过去除不溶性物质。
如果配有保护柱应先去掉保护柱进行分析。如果色谱柱阻塞可进行反冲洗。如果问题仍然存在色谱柱可能被强保留的污染物损坏建议使用恰当的再生程序。如果问题仍然存在可能是进口阻塞更换入口处的筛板或更换色谱柱。如果必要亦可更换色谱柱。
清洗的过程是延长色谱柱寿命的关键每次分析工作结束时要做好清场工作。如果流动相是缓冲盐先用5%甲醇水冲洗30min以上;如果流动相是离子对先用50%甲醇水冲洗30min以上;如果流动相是酸性溶剂先用纯水冲洗30min以上流速0.5mL#min-1最后过度到用色谱甲醇冲洗色谱柱目的是冲去吸附在柱上的强保留组分。如果用甲醇-水为流动相也应这样冲洗色谱柱在一定程度上可恢复柱效。