Anti-HBc常被视为“曾经感染乙肝病毒”的指标。所谓“曾经感染”泛指所有接触过乙肝病毒的人，包括正在感染的带原者，及已痊愈产生抗体的人，理论上这些人的Anti-HBc皆应该是阳性的。至于Anti-HBc阴性的人，代表未曾感染乙肝病毒，在确认Anti-HBs也为阴性的条件下，可选择注射疫苗以避免日后感染。对无乙肝带原的人而言，Anti-HBc通常只存在于自然感染痊愈后的患者，若抗体是经由注射乙肝疫苗而来，通常只产生Anti-HBs，而没有Anti-HBc。Anti-HBc的另一项重要用途是评估患者是否处于乙肝感染的“空窗期”，空窗期是指HBsAg的浓度已非常低，可能低于测定极限，且Anti-HBs还尚未产生，实验室数据为HBsAg（–）、Anti-HBs（–）、Anti-HBc（+）。但这种数据也经常发生在自然痊愈的患者经过多年之后Anti-HBs的效价逐渐减弱而消失，因此在解释这种数据时应特别谨慎。现今的化学冷光免疫法已能测到非常低浓度的HBsAg，解决了大部分的空窗期问题，Anti-HBc的使用机会也因此降低。
（注）：有些人在乙肝痊愈后许多年，未曾再接触过乙肝病毒，Anti-HBs或Anti-HBc的效价皆有可能会逐渐下降到测不到的地步。