ThermoStable V Reverse Transcriptase 反转录酶是在鼠源病毒反转录酶基础上进行定点突变改良而得。该酶去除了 RNase H 活性中,从而避免反转录过程中降解 RNA。同时经过突变文库筛选,使得其热稳定性更强(**活性温度 55℃),该酶在 65°C 条件下仍然有部分活性。
相比于低温条件下反转录反应,采用高温反转录可显著打开RNA 二级结构,从而提高复杂 RNA 模板的扩增性能、提高反转录 cDNA 的长度和产量,从而提高后续检测的灵敏度。
推荐的反转录温度设置为 55°C,无论是高 GC 或长片段模板,均可获得综合性的 cDNA 产量。
3. 反转录所得的 cDNA 可直接用于 PCR 反应或储存于-20°C。