国家标准食品中阿斯巴甜的测定(GB/T 22254-2008)
本文编自中华人民共和国卫生部与中国国家标准化管理委员会联合发布的《中华人民共和国国家标准》，名优酒研究中心真诚推荐。
本标准由中华人民共和国卫生部提出并归口。
本标准负责起草单位：中国疾病预防控制中心营养与食品安全所。
本标准参加起草单位：山东省疾病预防控制中心、吉林省疾病预防控制中心。
本标准适用于碳酸饮料、乳饮料、浓缩果汁和固体饮料中阿斯巴甜的测定。
根据阿斯巴甜易溶于水和乙醇等溶剂的特点，固体饮料中阿斯巴甜用蒸馏水在超声波振荡下提取，提取液用水定容；碳酸饮料类试样除二氧化碳后用水定容；乳饮料试样中阿斯巴甜用乙醇沉淀蛋白，上清液用乙醇+水（2+1）定容，提取液在液相色谱ODS C18反相柱上进行分离，在波长208nm出检测，以色谱峰的保留时间定性，外标法定量。
3.5 pH4.3的水：用乙酸调节水pH值为4.3。
3.6 阿斯巴甜标准储备液（1.00mg/mL）：称取0.1g阿斯巴甜标准品（精确至0.0001g），置于100mL容量瓶中，用pH4.3的水溶解并定容至刻度，置于冰箱保存，有效期为三个月。
称取约10g试祥（称样量精确到0.001g），50℃微温除去二氧化碳，用水定容到25 mL～50mL，4000r/min离心5 min，上清液经0.45μm水系滤膜过滤，备用。
称取约5g试样（称样量精确到0.001g），于50mL离心管，加入10mL乙醇，盖上盖子，轻轻上下颠倒数次（不能振摇），静置1 min，4 000 r／min离心5 min，上清液滤入25 mL容量瓶，沉淀用5 mL乙醇+水(2+1)洗涤，离心后合并上清液，用乙醇+水(2+1)定容至刻度，经0.45μm有机系滤膜过滤，备用。
称取0.2g～lg试样（精确到0.001g），加水后超声波振荡提取20min，并定容到25mL或50mL，4000r／min离心5min，上清液经0.45μm水系滤膜过滤，备用。
色谱柱：ODS C18柱，4.6mm×250mm，5μm。
流动相：甲醇+水(39+61)。
取阿斯巴甜标准溶液系列，在上述色谱条件下进行HPLC测定，绘制阿斯巴甜浓度一峰面积（峰高）的标准曲线或求出直线回归方程。
按标准曲线外标法计算试样中阿斯巴甜的含量，计算公式见式(1)：
c——由标准曲线计算出进样液中阿斯巴甜的浓度，单位为微克每毫升(μg／mL)；
在重复性条件下获得的两次独立测定结果的绝对差值不超过算术平均值的10%。
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