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这个帖子发布于13年零242天前,其中的信息可能已发生改变或有所发展。

各位战友:

本人最近的几次实验中,发现很多小黑点,有的在游动,而有的不动,小黑点随着培养时间的延长而逐渐增多,严重者可以铺满整个培养板,而且,它们会导致神经细胞聚集成堆,进而细胞出现崩解、死亡。

以前我曾经遇到过,但不是很多,估计与上述有所不同,而是与血清灭活等有关,这种情况容易消除。但这次我碰到的“小黑点”确实厉害,我已经把能想到的可能的污染源都检查了,而且不止一遍啊!实在是束手无策了,特请版主和各位战友不吝赐教!

首先可以肯定这些“小黑点”绝对不是胶质细胞,Ara-C对他根本没有作用;

我用的国产的杭州四季青胎牛血清,灭活和不灭活我都试过,结果一样,最近我又对所有可疑情况都进行了排查,发现还是血清的问题,我以前也没有遇到过这种情况,估计这次定的血清有问题,血清本身可能已经被污染了。

现在关于“小黑点”或者“黑焦虫“等的讨论,园子里已有很多,但目前尚无定论,欢迎各位战友跟帖交流,分享您的宝贵经验。

• 开放讨论→马,不是你想骑就能骑的~(9月11日更新)

谢谢wingsofdreams版主!

我同意您的看法,在细胞培养中,培养板或培养瓶内的小黑点,应该主要来自于三个方面:

1、血清灭活 我比较过,血清灭活会导致其内部分成分发生沉淀,也就是我们镜下所看到的“小黑点”;

2、细胞崩解 正如wingsofdreams版主所说,状态好的细胞周围没有小黑点,而状态较差的细胞周围有,崩解的细胞周围很多,这可能是细胞膜破裂后所释放的内容物,如线粒体等;

3、取材过程 在经过剪碎、消化、吹打等等程序后,接种细胞悬液与培养板中,镜下即可看到一些“脏东西”,比如组织块、小黑点,还有就是类似线头样的东西等等,这类情况只能尽可能减少而不可避免。

以上只是我个人看法,还请各位战友指正!

• 男,58岁,2020年9月体检发现左上肺结节,请会诊结节性质。