深红色晶体或无定型或结晶性粉末。无味、无臭。呈无水物状态时极易吸潮，暴露于空气中可吸水约12%。晶体吸水后在空气中稳定。溶于水（1g/80ml），水溶液呈酸性。遇强光可分散，在210-220℃高温下会变色。
促进红细胞的发育和成熟。将甲基丙二酰辅酶A转化成琥珀酰辅酶A，参与三羧酸循环，其中琥珀酰辅酶A与血红素的合成有关。
已知B12是几种变位酶的辅酶，如催化Glu转变为甲基Asp的甲基天冬氨酸变位酶、催化甲基丙二酰CoA转变为琥珀酰CoA的的甲基丙二酰CoA变位酶。B12辅酶也参与甲基及其他一碳单位的转移反应。