摘要：实验测定了16份蓖麻种质资源，蓖麻籽中蓖麻碱含量为1.337-2.572 mg/g，根据不同种质资源蓖麻碱的含量，将样本分为低含量、中低含量、中等含量、中高含量和高含量五种种质资源，可分别用于定向选育高、低蓖麻碱含量的蓖麻品种，有利于延长蓖麻产业链，同时也会有巨大的社会效益和经济效益。

关键词：蓖麻；蓖麻碱；含量测定

蓖麻籽的有毒成分为蓖麻毒蛋白、蓖麻碱、变应原和血球凝集素。蓖麻饼中的有毒成分随着制油方法的不同而不同，冷榨取油后饼粕中毒素含量较高，在机榨取油或预榨取油过程中，由于温度超过100℃，使饼粕中的蓖麻毒素和血球凝集素变性而失去活性，但蓖麻碱和变应原很少遭到破坏[1]。由于蓖麻饼应用的范畴不同，需要蓖麻碱的含量具有两重性，作为有机肥使用时，需要较高含量的蓖麻碱，有利于杀灭土壤中的线虫或其它害虫。而作为饲料应用时，由于蓖麻碱对家禽毒性较强，因此，只有将蓖麻饼中有毒物质去除，才能使之成为可利用的蛋白质饲料资源。通过育种途径，可以选择选育不同蓖麻碱含量的蓖麻品种，这将有利于蓖麻饼的深加工利用。进行不同种质资源蓖麻碱含量的测定，可以筛选出不同蓖麻碱含量的种质资源，为定向选蓖麻品种奠定基础。

1 样品及测定方法

1.1 样品及化学试剂

蓖麻种子样品16份，分别来自内蒙古、辽宁、山东。蓖麻碱标准品（纯度大于99%）。

1.2 主要仪器

分析天平：BSA224S 型电子天平。

高效液相色谱仪：Aglient1260 高效液相色谱仪（美国agilent 公司）。

1.3 测定方法

样品采用75℃甲醇提取，高效液相色谱测定蓖麻碱含量含量。

1.4 蓖麻碱标准溶液

1.4.1 蓖麻碱标准储备液

称取蓖麻碱标准品适量，用甲醇溶解，配制成浓度为1.00 mg/mL标准储备液。

1.4.2 蓖麻碱标准工作液Ⅰ

用甲醇逐次稀释蓖麻碱标准储备液至最终浓度分别为5.0 μg/mL、10 μg/mL、20 μg/mL、30 μg/mL和40 μg/mL的工作液。

1.4.3蓖麻碱标准工作液Ⅱ

用30%甲醇逐次稀释蓖麻碱标准储备液至最终浓度分别为0.5 μg/mL、2.0 μg/mL、5.0 μg/mL、10 μg/mL和20 μg/mL的工作液。

1.5 试样制备

按照GB∕T 20195的规定制备试样，粉碎过孔径0.45 mm目筛，充分混匀，装瓶，备用。

2 蓖麻碱含量测定

2.1 提取

准确称取蓖麻籽试样0.5g（精确至0.0001 g）于50 mL带螺口离心管中，加20mL甲醇，拧紧盖子，于75℃水浴中提取4h（约每30 min取出于涡旋振荡器上振荡30s）。取出于离心机上以3 000 r∕min离心10min，将上层清液通过带有定量滤纸的50 mL漏斗过滤于50 mL容量瓶中，残渣再分别用20 mL和10 mL甲醇按上述方法提取10 min，离心，合并提取液，最后用无水甲醇定容至刻度。

2.2 净化

移取提取液2.00 mL于10 mL试管中，于氮气吹干仪上吹干，加入2.00 mL氨水溶液，于涡旋振荡器上振荡30 s。

将固相萃取柱置于固相萃取装置上，依次用1.0 mL甲醇和1.0 mL水活化；加载1.00 mL该试样溶液，控制流速不超过1.0 mL/min；用1.0 mL水淋洗小柱，抽干1min；最后用1.00 mL 30%的甲醇洗脱，加压，完全收集洗脱液到进样瓶中。

2.3 测定

2.3.1色谱条件

色谱柱：C18填料，长150 mm，内径3.9 mm，粒度5μm。

流动相：乙腈+水＝10+90。

流速：1.0 mL∕min。

进样体积：20μL。

检测波长：308 nm。

2.3.2 定量方法 使用蓖麻碱标准工作液Ⅰ，以峰面积对浓度的工作曲线，对蓖麻粕样品进行外标法定量；同样使用蓖麻碱标准工作液Ⅱ，以峰面积对浓度的工作曲线，对样品进行外标法定量。

2 测定结果

测定实验于2016年4月在山东省农业科学研究院进行，16份品种材料样本蓖麻碱含量测定结果见表1，淄蓖麻7号含量最高，为2.572mg/g，品种102含量最低，为1.337mg/g。对测定数据进行聚类分析，结果见图1。

从图1可以看出，如果将16份种质资源按照蓖麻碱的含量分为五类，每一种类的品种资源为：

第一类：低含量种质资源，在本实验样品中仅有1个品种“102”，蓖麻碱含量为1.337mg/g，可用于选择选育低蓖麻碱含量品种。

第二类：中低含量种质资源，包括3个品种白蓖20、通蓖6号和Zb-10，蓖麻碱含量在1.596-1.729 mg/g之间，该类品种通过基因重组或诱变选择选育低蓖麻碱含量品种。

第三类：中等含量种质资源，有6个品种，白蓖22、Zb-14、Zb-12、C14002、淄蓖麻8号和101，蓖麻碱含量在1.883-2.161 mg/g之间，可向高、低含量双向利用。

第四类：中高含量种质资源，在本实验样品中仅有1个品种“淄蓖麻9号”，蓖麻碱含量为2.309 mg/g，该类品种通过基因重组或诱变选择选育高蓖麻碱含量品种。

第五类：高含量种质资源，有5个品种，淄蓖麻5号、Zb-11、Zb-13、淄蓖麻6号和淄蓖麻7号，蓖麻碱含量在2.439-2.572 mg/g之间，可用于选择选育高蓖麻碱含量品种。

3 讨论

张小红等对10批蓖麻籽中蓖麻碱含量进行测定，结果为0.1695%～0.2396%[2]，与本实验结果相似。蓖麻碱是蓖麻中除毒蛋白之外的主要毒素，具有杀虫和杀鼠活性，在医药方面具有肝保护功能和改善记忆功能，因此蓖麻碱在农业和医药行业具有广阔的应用前景。但是，蓖麻主要用来制备蓖麻油，蓖麻饼粕的应用较为广泛，如果用于畜禽饲料，其中含有的蓖麻碱就要被脱除，目前的方法尚不能完全去除，对畜禽仍然有一定的危害，低含量的蓖麻品种榨制的饼粕，蓖麻碱具有较低的含量，利于完全去除。反之，若以从蓖麻饼粕中提取蓖麻碱为目的，则应利用高含量蓖麻碱的种质资源来选育高含量的蓖麻品种，可以降低蓖麻碱的提取成本。通过对种质资源的筛选，定向选育高、低蓖麻碱含量的蓖麻品种对延长蓖麻产业链非常重要，同时也会有巨大的社会效益和经济效益。

参考文献

[1]于丽娜,冯建雄,孙杰.等.蓖麻碱的研究与应用[J].现代农业科技,2012,(3):218-220.

[2]张小红,李翠丽,于俊杰.等.蓖麻子中蓖麻碱的提取分离与含量测定[J].中国新药杂志,2011,20(18):1741-1744.